Proteinbiochemie

Methoden

Wir stellen Proteine im Labormaßstab her. Unsere wissenschaftliche und technische Expertise umfasst den vollständigen Arbeitszyklus von der Sequenz bis zum hochreinen funktionellen Protein:

• Molekularbiologische Arbeiten zur Generierung von Expressionsvektoren entsprechend der Proteineigenschaften
• Expression der Proteine in verschiedenen Zellsystemen (E. coli, Hefe, Säugerzellen, Insektenzellen) im Batch-Verfahren oder als FED-Batch-Fermentation (5l-Maßstab)
• Reinigung durch eine Vielfalt an chromatographischen Verfahren (Affinitätschromatographie, Hydrophobe Interaktionschromatographie, Größenausschlusschromatographie, Ionenaustauschchromatographie, Reversed-Phase Chromatographie)
• Begleitende Proteinanalytik zur Qualitätssicherung

• Auf Basis von spektrophotometrischen, fluorimetrischen oder Fluoreszenzpolarisationsmessungen im 96- oder 384-well-Format
  
• Parameter wie K_m, k_cat, K_i, IC₅₀
• Untersuchungen zum Hemmmechanismus von Inhibitoren
• Löslichkeitsbestimmung für Substanzen durch Nephelometrie

• Analyse amyloidogener Proteine mittels fluorimetrischer Methoden (Thioflavin T-Assay)
• Statistische Analyse der Aggregationskinetiken (Bestimmung der lag-Phase-Zeit und Aggregationsrate)
• Visualisierung der Aggregation (in Zusammenarbeit mit Kooperationspartnern) über Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) bzw. Rasterkraftmikroskopie (AFM, atomic force microscope)
• Analysen zur Inhibierung der Aggregation durch verschiedene Wirkstoffe (Antikörper, small molecules, pflanzliche / bakterielle Extrakte)