Durchflusszytometrie

Am Fraunhofer IZI stehen moderne Durchflusszytometer und Sorter zur Verfügung. Gern helfen wir bei der Auswahl des Geräts für die geplanten Experimente.

Unter anderem verfügen wir über die nachfolgenden Geräte.

• Spezifikationen: Laser: 405 nm, 488 nm, 633 nm, 8 Fluoreszenzkanäle
• Assays: Oberflächenmarker, Differenzierung/Veränderung von Zellen, Lebend-Tot-Assay, Human & murin, Primäre Zellen/Zellkultur (z.B. PBMCs, CAR-T, CAR-NK, versch. Zelllinien.) Primärzellen (vorrangig Maus, teilweise Human, selten Ratte) - Blutzellen bzw. Einzelzellsuspensionen verschiedener Organe, Immunstatus, Phänoytpsierung, Intrazell. Messung: Zytokine, Transkriptionsfaktoren, Proliferation, etc., Zellkulturproben
• Referenzprojekte
  • Allometric Dose Retranslation Unveiled Substantial Immunological Side Effects of Granulocyte Colony–Stimulating Factor After Stroke
  • Flow cytometric characterization of brain dendritic cell subsets after murine stroke
  • High-dosage granulocyte colony stimulating factor treatment alters monocyte trafficking to the brain after experimental stroke
  • Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

• Spezifikationen: 6-Wege Sorter, Laser: 488, 561, 640, 2ps Pulslaser (375, 488), 8 Fluoreszenzkanäle (erweiterbar) / Octagonsystem (BD)​
• Assays: Lebend-Tot-Färbung, Apoptose/Nekrose, Mitochondrienaktivität, Oberflächenmarker zur Zellidentität und -charakterisierung, Oberflächenmarker + intrazelluläre zur Bestimmung der Aktivierung (Immunzellen, pro/antiinflammatorisch), Nachweis Transkriptionsfaktoren als Identitäts- und Funktionsnachweis, sowie Differenzierungsstatus (Pluripotenz, Lunge, etc), Nachweis Transgenexpression bei Transfektionen und Transduktionen (mRNA, Plasmide, virale Vektoren), Sortierung von Zellen über Durchflusszytometrie

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 638 nm), 13 Fluoreszenzkanäle (450/45, 525/40 (2), 585/42, 610/20 (2), 660/10 (2), 690/50, 712/25, 780/60 (3)), Messungen im Hochdurchsatz möglich
• Assays: Internalisierung; 10-Farben-Immunophänotypisierung; Seneszenz-Assay; Zellzyklusanalysen; Intrazelluläre-Zytokinfärbung

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 638 nm), Aufnahme hochauflösender Bilder jeder Zelle direkt im Fluss (Hell- und Dunkelfeld (SSC), sowie bis zu 12 Fluoreszenzmarker), Messungen im Hochdurchsatz möglich
•  Assays: Präsentation zum Amnis®ImageStream®XMk II: Microscopy in Flow

• Spezifikationen: 2 Laser (488 nm, 640 nm), 4 Fluoreszenzkanäle gleichzeitig (vorhandene Filter: 533/30, 585/40, 670LP, 675/25), Messungen im Hochdurchsatz möglich
• Assays: Messung von Beads, Zellen, Bakterien, Apoptose-Assay, Bindungskurven (EC50 Wertberechnung), Transfektionseffizienzen
• Referenzprojekt
  • Pinpointed Stimulation of EphA2 Receptors via DNA-Templated Oligovalence

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 640 nm), 8 Fluoreszenzkanäle, Messungen im Hochdurchsatz möglich, automatisches Färben
• Assays: Zellzahlbestimmung, Lebend-Tot-Färbung, Apoptose/Nekrose, Mitochondrienaktivität, Oberflächenmarker zur Zellidentität und -charakterisierung, Oberflächenmarker + intrazelluläre zur Bestimmung der Aktivierung (Immunzellen, pro/antiinflammatorisch), Nachweis Transkriptionsfaktoren als Identitäts- und Funktionsnachweis, sowie Differenzierungsstatus (Pluripotenz, foregut endoderm, Lunge, etc), Nachweis Transgenexpression bei Transfektionen und Transduktionen (mRNA, Plasmide, virale Vektoren)
• Referenzprojekt
  • Efficient Redirection of NK Cells by Genetic Modification with Chemokine Receptors CCR4 and CCR2B

• Spezifikationen: 2 Fluoreszenzkanäle vom violetten (405 nm) Laser, 5 vom blauen (488 nm) Laser und 3 vom roten (638 nm) Laser, Photodioden (Vorwärts- und Seitenstreuung), Photomultiplier-Röhren (Fluoreszenz), Messungen im Hochdurchsatz möglich, Zellzahlbestimmung möglich
• Beispiele für Assays: u.a. Immunstatus humanes Blut; NK-Zellen; regulatorischen T-Zellen (Tregs); Proliferationsassays