Durchflusszytometrie

Am Fraunhofer IZI stehen moderne Durchflusszytometer und Sorter zur Verfügung. Gern helfen wir bei der Auswahl des Geräts für die geplanten Experimente.

Unter anderem verfügen wir über die nachfolgenden Geräte.

• Spezifikationen: Laser: 405 nm, 488 nm, 633 nm, 8 Fluoreszenzkanäle
• Assays: Oberflächenmarker, Differenzierung/Veränderung von Zellen, Lebend-Tot-Assay, Human & murin, Primäre Zellen/Zellkultur (z.B. PBMCs, CAR-T, CAR-NK, versch. Zelllinien.) Primärzellen (vorrangig Maus, teilweise Human, selten Ratte) - Blutzellen bzw. Einzelzellsuspensionen verschiedener Organe, Immunstatus, Phänoytpsierung, Intrazell. Messung: Zytokine, Transkriptionsfaktoren, Proliferation, etc., Zellkulturproben
• Referenzprojekte
  • Mucosal immunization with a low-energy electron inactivated respiratory syncytial virus vaccine protects mice without Th2 immune bias
  • Allometric Dose Retranslation Unveiled Substantial Immunological Side Effects of Granulocyte Colony–Stimulating Factor After Stroke
  • Flow cytometric characterization of brain dendritic cell subsets after murine stroke
  • High-dosage granulocyte colony stimulating factor treatment alters monocyte trafficking to the brain after experimental stroke
  • Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

• Spezifikationen: 6-Wege Sorter, Laser: 488, 561, 640, 2ps Pulslaser (375, 488), 8 Fluoreszenzkanäle (erweiterbar) / Octagonsystem (BD)​
• Assays: Lebend-Tot-Färbung, Apoptose/Nekrose, Mitochondrienaktivität, Oberflächenmarker zur Zellidentität und -charakterisierung, Oberflächenmarker + intrazelluläre zur Bestimmung der Aktivierung (Immunzellen, pro/antiinflammatorisch), Nachweis Transkriptionsfaktoren als Identitäts- und Funktionsnachweis, sowie Differenzierungsstatus (Pluripotenz, Lunge, etc), Nachweis Transgenexpression bei Transfektionen und Transduktionen (mRNA, Plasmide, virale Vektoren), Sortierung von Zellen über Durchflusszytometrie

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 638 nm), 13 Fluoreszenzkanäle (450/45, 525/40 (2), 585/42, 610/20 (2), 660/10 (2), 690/50, 712/25, 780/60 (3)), Messungen im Hochdurchsatz möglich
• Assays: Internalisierung; 10-Farben-Immunophänotypisierung; Seneszenz-Assay; Zellzyklusanalysen; Intrazelluläre-Zytokinfärbung
• Referenzprojekt
  • Transcriptomic signatures reveal a shift towards an anti-inflammatory gene expression profile but also the induction of type I and type II interferon signaling networks through aryl hydrocarbon receptor activation in murine macrophages

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 638 nm), Aufnahme hochauflösender Bilder jeder Zelle direkt im Fluss (Hell- und Dunkelfeld (SSC), sowie bis zu 12 Fluoreszenzmarker), Messungen im Hochdurchsatz möglich
•  Assays: Präsentation zum Amnis®ImageStream®XMk II: Microscopy in Flow

• Spezifikationen: 2 Laser (488 nm, 640 nm), 4 Fluoreszenzkanäle gleichzeitig (vorhandene Filter: 533/30, 585/40, 670LP, 675/25), Messungen im Hochdurchsatz möglich
• Assays: Messung von Beads, Zellen, Bakterien, Apoptose-Assay, Bindungskurven (EC50 Wertberechnung), Transfektionseffizienzen
• Referenzprojekt
  • Pinpointed Stimulation of EphA2 Receptors via DNA-Templated Oligovalence

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 640 nm), 8 Fluoreszenzkanäle, Hochdurchsatz-Kompatibilität durch Buffer Supply Station, automatisches Färben, Messen im Express- und benutzerdefinierten Modus möglich
• Assays: Zellzahlbestimmung, Lebend-Tot-Färbung, Apoptose / Nekrose, Mitochondrienaktivität, Oberflächenmarker zur Zellidentität und -charakterisierung, Bestimmung der Zellaktivierung (Immunzellen, pro/antiinflammatorisch), Identitäts- und Funktionsnachweis von Transkriptionsfaktoren, sowie Differenzierungsstatus (Pluripotenz, foregut endoderm, Lunge, etc.), Nachweis Transgenexpression bei Transfektionen und Transduktionen (mRNA, Plasmide, virale Vektoren), Kit-basierte Konzentrationsbestimmung von Zytokinen
• Referenzprojekte
  • Development of KoRV-pseudotyped lentiviral vectors for efficient gene transfer into freshly isolated immune cells
  • Comparison of two lab-scale protocols for enhanced mRNA-based CAR-T cell generation and functionality
  • Optimized peptide nanofibrils as efficient transduction enhancers for in vitro and ex vivo gene transfer
  • CD44v6 specific CAR-NK cells for targeted immunotherapy of head and neck squamous cell carcinoma

• Spezifikationen: 3 Laser (405 nm, 488 nm, 640 nm), 8 Fluoreszenzkanäle, Messungen im Hochdurchsatz möglich, automatisches Färben
• Assays: Zellzahlbestimmung, Lebend-Tot-Färbung, Apoptose/Nekrose, Mitochondrienaktivität, Oberflächenmarker zur Zellidentität und -charakterisierung, Oberflächenmarker + intrazelluläre zur Bestimmung der Aktivierung (Immunzellen, pro/antiinflammatorisch), Nachweis Transkriptionsfaktoren als Identitäts- und Funktionsnachweis, sowie Differenzierungsstatus (Pluripotenz, foregut endoderm, Lunge, etc), Nachweis Transgenexpression bei Transfektionen und Transduktionen (mRNA, Plasmide, virale Vektoren)
• Referenzprojekte
  • Development of KoRV-pseudotyped lentiviral vectors for efficient gene transfer into freshly isolated immune cells
  • Efficient Redirection of NK Cells by Genetic Modification with Chemokine Receptors CCR4 and CCR2B
  • CD44v6 specific CAR-NK cells for targeted immunotherapy of head and neck squamous cell carcinoma

• Spezifikationen: 2 Fluoreszenzkanäle vom violetten (405 nm) Laser, 5 vom blauen (488 nm) Laser und 3 vom roten (638 nm) Laser, Photodioden (Vorwärts- und Seitenstreuung), Photomultiplier-Röhren (Fluoreszenz), Messungen im Hochdurchsatz möglich, Zellzahlbestimmung möglich
• Beispiele für Assays: u.a. Immunstatus humanes Blut; NK-Zellen; regulatorischen T-Zellen (Tregs); Proliferationsassays